prp两次离心法(4种prp离心制备方法)

prp两次离心法(4种prp离心制备方法)1 生理盐水 称取 NaCl 0 80 g 溶解于 100 mL 超纯水中 置于 4 备用 2 低渗缓冲液 称取 Tris 0 61 g KCl 0 37 g MgSO4 7H2O 0 25g 溶解于 500 mL 超纯水中 用 HCl 调节 pH 值为 7 4 后 置于 4 储存 备用 MRGPRX2 HEK293 细胞膜的制备 MRGPRX2 HEK293 细胞于 37 5 CO2 及饱和湿度条件下

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  MRGPRX2-HEK293细胞膜的制备
        MRGPRX2-HEK293细胞于37℃、5%CO2及饱和湿度条件下,培养于含10%的胎牛血清、10 U·mL-1青霉素、10 U·mL-1链霉素的DMEM培养基中,至细胞生长至约80%时,用0.25%胰蛋白酶消化液进行消化,并用少量DMEM培养基制成单细胞悬液,计数,使细胞总量不低于1×107个。将细胞悬液于1100 g离心10 min,倾出上清液,用低渗液混悬沉淀,并超声破膜30 min后匀浆;混悬液经1000 g离心10 min,取上清液,在4℃下,12000 g离心20 min,弃上清液,加入10 mL低渗液将沉淀重悬,再次12000 g 离心。取细胞膜沉淀,加入5 mL 预冷的生理盐水重悬,得到细胞膜悬液,备用。

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